多肽

{{百科小圖片|bkbgr.jpg|活性[[肽]]}}
<b>肽(peptide)</b>是α-[[氨基酸]]以肽鏈連接在一起而形成的[[化合物]]，它也是[[蛋白質(zhì)]]水解的中間產(chǎn)物。

一般肽中含有的氨基酸的數(shù)目為二到九,根據(jù)肽中氨基酸的數(shù)量的不同,肽有多種不同的稱呼:由兩個(gè)氨基酸[[分子]][[脫水]]縮合而成的化合物叫做[[二肽]]，同理類推還有[[三肽]]、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫<b>[[多肽]]，</b>它們的分子量低于10，000Da（Dalton，道爾頓），能透過(guò)[[半透膜]]，不被[[三氯乙酸]]及硫酸銨所沉淀。也有文獻(xiàn)把由2~10個(gè)氨基酸組成的肽稱為[[寡肽]]（小分子肽）；10~50個(gè)氨基酸組成的肽稱為多肽；由50個(gè)以上的氨基酸組成的肽就稱為蛋白質(zhì),換言之,蛋白質(zhì)有時(shí)也被稱為'''多肽'''。

多肽也簡(jiǎn)稱為肽，是20世紀(jì)被發(fā)現(xiàn)的。多肽有生物活性多肽和人工合成多肽兩種。生物提取的多肽具有很強(qiáng)的活性，所以叫做活性肽！只有活性的肽才能對(duì)人體產(chǎn)生很好的效果!但是人工合成的多肽有很多是沒(méi)有活性的，是需要篩選的，只有活性肽才能被人體安全使用！　　
===肽對(duì)人體有什么影響？===
活性肽主要控制人體的生長(zhǎng)、發(fā)育、[[免疫調(diào)節(jié)]]和新陳代謝，它在人體處于一種平衡狀態(tài)，若活性肽減少后，人體的機(jī)能發(fā)生重要變化，對(duì)于兒童來(lái)說(shuō)，他的生長(zhǎng)、發(fā)育變得緩慢，甚至停止，長(zhǎng)久下去就形成了[[侏儒]]，對(duì)成年人或老年人，缺少活性肽后，自身的免疫力就會(huì)下降，新陳代謝紊亂，[[內(nèi)分泌失調(diào)]]，引起各種[[疾病]]的產(chǎn)生，如[[失眠]]、身體[[消瘦]]或浮腫。由于活性肽還作用于[[神經(jīng)系統(tǒng)]]，因此人體就會(huì)變得動(dòng)作遲緩，頭腦不再聰慧，更主要的是活性肽減少，直接引起人身體各部位逐漸出現(xiàn)全面[[衰老]]，引發(fā)各種疾病.　　
===人體活性肽有哪幾個(gè)分泌周期？===
在不同的年齡時(shí)期，各種活性肽的分泌量也有很大差別，按分泌量劃分，人的一生一般可分為：

①分泌充足期（25歲以前的青年期）這個(gè)時(shí)期[[內(nèi)分泌]]量均衡、[[免疫功能]]強(qiáng)勁，人體一般不易出現(xiàn)疾??；

②分泌不足期（失衡期）（30—50歲壯年和中年期）這一時(shí)期如果活性肽分泌不足或失衡會(huì)出現(xiàn)各種相關(guān)的[[亞健康]]狀態(tài)和輕微疾病[[癥狀]]（40歲以上的人群常見(jiàn)）；

③分泌匱乏期（嚴(yán)重不足期）（50歲以上中年和老年期）這一時(shí)期嚴(yán)重如果活性肽嚴(yán)重不足和嚴(yán)重失衡，可能出現(xiàn)非常突出的衰老癥狀，或會(huì)引起各種相關(guān)疾病發(fā)生（50歲以上人群比較明顯）；

④分泌終止期（衰老期），這一時(shí)期很短，由于控制人體內(nèi)分泌的“司令官”活性肽不分泌或分泌減少，從而導(dǎo)致[[細(xì)胞]]功能衰退，引發(fā)器官功能[[衰竭]]和喪失，最后導(dǎo)致生命終結(jié)。　　
===多肽===
由多個(gè)分子α-氨基酸的-NH2與-COOH互相縮合失水后形成10個(gè)肽鍵(-CONH-)以上的長(zhǎng)鏈化合物。它包括多種在人的機(jī)體中具一定[[生理]]活性的化合物，可以從動(dòng)物組織中提取，也可能人工合成。蛋白質(zhì)即是以各種氨基酸按一定順序以肽鍵形成的長(zhǎng)鏈肽，通過(guò)多種次級(jí)鍵交聯(lián)結(jié)合而成的[[高分子化合物]]，蛋白質(zhì)具有復(fù)雜的[[四級(jí)結(jié)構(gòu)]]，通過(guò)不同程度的水解，破析結(jié)構(gòu)可得包括多肽等的產(chǎn)物：蛋白質(zhì)→[[蛋白]]脈(proteose) →[[蛋白胨]](peptone) →多肽→寡肽(oligopeptide,2～10個(gè)肽鍵的長(zhǎng)鏈肽) →氨基酸。這同時(shí)也表明了蛋白質(zhì)的合成途徑。因此，借人工合成多肽，不僅可用于[[生化]]制藥工業(yè)，還可用來(lái)研究闡明蛋白質(zhì)的合成途徑及其結(jié)構(gòu)。

人體很多活性物質(zhì)都是以肽的形式存在的，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)人體干重的70%以上都是蛋白質(zhì)，所以說(shuō)沒(méi)有肽，就沒(méi)有活性，就沒(méi)有生命。肽涉及人體的[[激素]]、[[神經(jīng)]]、細(xì)胞生長(zhǎng)和[[生殖]]各領(lǐng)域，其重要性在于調(diào)節(jié)體內(nèi)各個(gè)系統(tǒng)和細(xì)胞的生理功能，激活體內(nèi)有關(guān)酶系，促進(jìn)[[中間代謝]]膜的通透性，或通過(guò)控制DNA[[轉(zhuǎn)錄](méi)]或影響特異的[[蛋白合成]]，最終產(chǎn)生特定的[[生理效應(yīng)]]。肽是涉及人體內(nèi)多種細(xì)胞功能的重要物質(zhì)。肽可以合成細(xì)胞，并調(diào)節(jié)細(xì)胞的功能活動(dòng)。肽在人體作為[[神經(jīng)遞質(zhì)]]，傳遞信息。肽可在人體作為運(yùn)輸工具，將人體所食的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與各種[[維生素]]、[[生物素]]、鈣及對(duì)人體有益的[[微量元素]]輸送到人體各細(xì)胞、器官和組織。肽是人體重要的生理[[調(diào)節(jié)物]]，它可全面調(diào)節(jié)人體生理功能，增強(qiáng)和發(fā)揮人體生理活性，它具有重要的[[生物學(xué)]]功能。肽對(duì)人的細(xì)胞活性、功能活動(dòng)、生命存在太重要了。但現(xiàn)代人因各種因素使人體中的肽流失、損失，合成肽的能力大大減弱，因此現(xiàn)代人體缺乏肽，必須補(bǔ)充人工合成肽，補(bǔ)肽就是補(bǔ)活性，補(bǔ)肽就是補(bǔ)活力，補(bǔ)肽就是補(bǔ)生命。（摘自 酶法多肽專家鄒遠(yuǎn)東教授 《酶法多肽論》）　　
==多肽的保存==
多肽類[[保健食品]]只需置于陰涼干燥處即可。

對(duì)于多肽[[試劑]]和多肽類藥物則需要保存在干燥器中。在將它們暴露于空氣之前， [[冷凍干燥]]多肽可以放于室溫。這將是濕度影響減少，當(dāng)無(wú)法冷凍干燥時(shí)，最好的方法是以小的工作樣量存放。對(duì)于含Cys, Met orTrP的多肽試劑，脫氧緩沖劑對(duì)其溶解必不可少，因?yàn)檫@種多肽試劑可易空氣氧化，在封瓶前，慢慢流過(guò)多肽試劑的氮?dú)饣驓鍤庖矔?huì)降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽試劑也容易降解，所有這些肽與不含這些有問(wèn)題解苷的那些肽相比，生命期有限。

多肽具廣泛的[[溶解性]]。多肽不溶的主要問(wèn)題是形成[[二級(jí)結(jié)構(gòu)]]。除了最太肽外，這點(diǎn)都會(huì)發(fā)生， 在有多重疏水[[殘基]]的肽中更顯著。鹽會(huì)促進(jìn)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在[[無(wú)菌]][[蒸餾水]]或去離子中溶解多肽。如需要增加溶解率， 可用聲處理。溶解仍有問(wèn)題， 加少量稀[[乙酸]]（10%）或氨水，會(huì)便于溶解。

要長(zhǎng)期保存多肽試劑， 最好冷凍干燥，冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無(wú)降解。溶液中的多肽遠(yuǎn)不穩(wěn)定。 多肽易受[[細(xì)菌]]降解，應(yīng)用無(wú)菌[[純化水]]溶解。

含有Met, Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化，壽命有限。應(yīng)溶于無(wú)氧溶劑， 為防止重復(fù)凍融的破壞， 建議溶解過(guò)量的肽的便實(shí)驗(yàn)，其余多肽以固體形成保存?！　?==多肽的溶解性==
大多數(shù)肽的首選溶劑是超純抽氣水。稀乙酸或氨水分別對(duì)于堿性或酸性多肽的溶解很重要。這些方法不溶的多肽， 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle來(lái)溶解，這些溶劑可能某些實(shí)驗(yàn)有[[副作用]]。所以我們建議設(shè)計(jì)多肽時(shí)要加注意。

殘基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val將全增加多肽的溶解難度?！　?==多肽的生產(chǎn)方法==
隨著科技的發(fā)展，生產(chǎn)肽的方法也在不斷發(fā)展。　　
===1. 五六十年代，主要是從動(dòng)物臟器獲取肽。===
如[[胸腺肽]]，其生產(chǎn)方法是將剛生下來(lái)的小牛宰殺之后，割下其[[胸腺]]，然后用震蕩分離的[[生物技術(shù)]]，將小牛胸腺中的肽震蕩分離出來(lái)，制{{百科小圖片|bkbgs.jpg|多肽固相合成法}}成胸腺肽[[針劑]]。這種胸腺肽主要用于人體[[免疫]]。目前，這種肽已處于淘汰狀態(tài)。因現(xiàn)在世界上流行“[[瘋牛病]]”，這種[[病毒]]主要吞噬動(dòng)物[[大腦]]中的蛋白質(zhì)，破壞其腦組織、細(xì)胞及神經(jīng)。人體一旦染上此病毒，比患上[[癌癥]]還可怕，最終成為“植物人”或很快死亡。還有從人體[[血液]]中提煉出來(lái)的肽 ，其副作用也很大，它不僅容易使人體染上[[甲肝]]、[[乙肝]]、丙肝、[[丁肝]]、艾滋病毒、性病病毒，而且有排異[[過(guò)敏反應(yīng)]]，這種反應(yīng)一旦出現(xiàn)，生命就危在旦夕?！　?===2. 固相合成法、液相合成法生產(chǎn)的肽。===
用這種方法生產(chǎn)肽的企業(yè)在美國(guó)硅谷就有一家。他們主要是購(gòu)買世界上一些精細(xì)化工廠生產(chǎn)的氨基酸為原料定向合成某種單肽，屬醫(yī)藥原料中間體，主要用于[[西藥]]配方，以增強(qiáng)藥效、增強(qiáng)人體對(duì)藥的吸收速度和吸收率。　　
===3. 酸解法或堿解法生產(chǎn)的多肽。===
這種肽主要出現(xiàn)在日本。用酸解法生產(chǎn)的“[[大豆]]多肽”，屬“食品添加劑”，主要用于老人和兒童食品，其目的是增強(qiáng)這兩種人群對(duì)食品營(yíng)養(yǎng)的吸收?，F(xiàn)在，世界上擁有“大豆多肽”的國(guó)家只有日本和中國(guó)。但其所用的原料、水解法和產(chǎn)品性質(zhì)大有不同。日本所用原料是豆粕，水解方法是酸法，生產(chǎn)的肽酸性化學(xué)物質(zhì)難以除盡，而且有苦味，需用[[活性炭]]吸附、脫苦，而活性炭免不了會(huì)侵入肽體。　　
===4. 酶法生產(chǎn)的生物活性肽。===
酶法生產(chǎn)的生物活性肽。這種肽主要產(chǎn)在中國(guó)，代表著當(dāng)今世界肽研究、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、創(chuàng)新的水平和潮流。酶法生產(chǎn)的生物活性肽是用人體所需要的食品級(jí)植物[[蛋白酶]]，將人體平常所食的食物蛋白質(zhì)酶解成小分子活性多肽。它具有極強(qiáng)的生物活性和多樣性，已在世界范圍內(nèi)引起關(guān)注，成為當(dāng)今世界追崇的熱點(diǎn)。如武漢九生堂生產(chǎn)的“大豆多肽”，所用原料是含量在90%以上的大豆分離蛋白，水解方法是酶法，所用的酶屬食品級(jí)植物蛋白酶。生產(chǎn)的“大豆多肽”無(wú)苦味，且風(fēng)味芳香宜人，對(duì)人體無(wú)任何[[毒副作用]]。產(chǎn)品屬終端產(chǎn)品，被中國(guó)創(chuàng)新基金列為無(wú)償資助項(xiàng)目，現(xiàn)在已實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，其終端產(chǎn)品“大豆多肽”口服液是世界上第一個(gè)用酶法生產(chǎn)的大豆多肽終端產(chǎn)品，在第89屆廣交會(huì)上受到世界客商的青睞?！　?==多肽的合成==
具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成：{{百科小圖片|bkbgt.jpg|多肽合成}}　　
===一、去保護(hù)：===
Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（piperidine）去 除氨基的保護(hù)基團(tuán)?！　?===二、激活和交聯(lián)：===
下一個(gè)氨基酸的羧基被一種[[激活劑]]所激活。激活的單體 與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián)，形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反 應(yīng)完成。循環(huán)：這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成。 洗脫和脫保護(hù)：多肽從柱上洗脫下來(lái)，其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑（TFAl） 洗脫和脫保護(hù)?！　?==HPLC分析和[[純化]]==
分析HPLC使用柱子和泵系統(tǒng)，可以經(jīng)受傳遞[[高壓]]，這樣可以用極細(xì)的微粒（3-10μ m）做填料。由此多肽要在幾分鐘內(nèi)高度被分析。{{百科小圖片|bkbgu.jpg|高效液相色譜hplc流程示意}}HPLC分兩類：離子交換和反相。 離子交換HPLC依靠多肽和固相間的直接電荷相互作用。柱子在一定PH范圍帶有特定電荷衍變成一種離子體，而多肽或多肽混合物，由其氨基酸組成表現(xiàn)出相反電荷。 分離是一種電荷相互作用，通過(guò)可變PH， 離子強(qiáng)度， 或兩者洗脫出多肽，通常， 先用低離子強(qiáng)度的溶液，以后逐漸加強(qiáng)或一步一步加強(qiáng)，直到多肽火柱中洗脫出。離子交換分離的一個(gè)例子使用強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱。如sulfoethylaspartimide通過(guò)酸性PH中帶正電來(lái)分離。

反相HPLC條件與正常層析正相反。多肽通過(guò)疏水作用連到柱上，用降低離子強(qiáng)度洗脫， 如增加[[洗脫劑]]的疏水性。通常柱子由共價(jià)吸附到硅上的碳?xì)渫殒湗?gòu)成，這種鏈長(zhǎng)度為G4-G8碳原子。 由于洗脫是一種疏水作用。長(zhǎng)鏈柱比短鏈對(duì)小的， 高帶電肽好。另一方面大的疏水肽用短鏈柱洗脫好。 然而，總體實(shí)踐中， 這兩類柱互變無(wú)多少顯著差別，別類載體由碳水化合物構(gòu)成， 比如[[苯基]]。

典型的操{{百科小圖片|bkbgv.jpg|[[青蒿素]]hplc法檢測(cè)圖譜}}作常由兩綬[[沖劑]]組成，0.1%TFA-H2o和80% acetonitrile 0.1%TFA--H2o稀acetonitrile。用線型梯變以每分鐘0.5%到1.0%改變的速度混合。常見(jiàn)分析和純化用柱為4.6×250mm(3-10μ m)和22×250mm(10μ m). 如果用徑向填柱，那么大小是8×100（3-10μ m）和25×250mm(10μ m)

大量各種緩沖劑含許多不同試劑，比如heptafluorobutyric酸，0.1%[[磷酸]]， 稀He formic酸(5-6%, pH2-4), 10-100mM NH4HCO3, [[醋酸鈉]]/氨，TFA/TEA，[[磷酸鈉]]或鉀，異戊酚。這樣許多不同組合可形成緩沖劑，但要注意一點(diǎn)：硅反相柱料不能長(zhǎng)時(shí)間暴露于高pH，甚至微堿pH， 因?yàn)檫@樣會(huì)破壞柱子。

不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%， 而肽含量相關(guān)帶電基團(tuán)（如Arg, Lys ）的抗離子量和肽親水性決定。這是合成肽的本身特性。　　

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