A+醫(yī)學(xué)百科 >> 離心

離心(centrifugation)，將溶液圍繞軸心高速旋轉(zhuǎn)，靠離心力使某些組分沉出，某些組分仍留在上清液中的技術(shù)。是生物化學(xué)中最基本的實(shí)驗(yàn)操作。近代超速離心的發(fā)展，使許多蛋白質(zhì)及核酸的分離成為可能，還可通過超速離心鑒定它們的均一性和純度，測定它們的分子量。在臨床化驗(yàn)中離心已成為不可缺少的實(shí)驗(yàn)手段，例如分離血清，制備各種血液成分，制備去蛋白血濾液，沉出尿沉渣，以及放射免疫分析中分離免疫復(fù)合物等，無不需要借助于離心。通過真空離心以促進(jìn)液體的揮發(fā)，還可達(dá)到濃縮和干燥的目的。

通常離心力 (F)與沉降顆粒（或分子）的有效質(zhì)量(m)成正比，也與離心半徑(r)及角速度 (ω)的平方成正比

F=mω²r

離心力若以地心引力 (g)的倍數(shù)來表示，則稱相對離心力(RFC)

RFC=(1.119×10^-5)(rpm)²r上式中rpm代表每分鐘轉(zhuǎn)速次數(shù)，r為離心半徑。設(shè)r=7cm，rpm=20000r/min（轉(zhuǎn)/分），則可自上式求得RFC=32000g。一般細(xì)胞核可在600g下沉出，線粒體須20000g時(shí)方可沉出。而要使蛋白質(zhì)、核酸這樣的生物大分子沉淀，必須加大RFC達(dá)10⁵～10⁶g，這就是超速離心?，F(xiàn)在超速離心機(jī)的轉(zhuǎn)速已能達(dá)到120000r/min，相當(dāng)于6×10⁵g。在超速離心下，粒子的沉降速度(υ)與離心加速度(ω²r)的比值，稱為沉降系數(shù)(s)，。大多數(shù)生物大分子的s在10^-13～10^-11(秒)的范圍，為方便起見，以斯維德貝格(S)為單位表示之，S=1×10^-13s(秒)，S的數(shù)量大者表示粒子的質(zhì)量重。一般蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)值為1S～10S，核酸的沉降系數(shù)為30S～50S 。

為增進(jìn)超速離心的分離效果，避免較重顆粒沉降時(shí)擾亂液層，乃有密度梯度離心的設(shè)計(jì)。這是在離心前，先將不同密度的蔗糖溶液加至離心管中，其密度由管底至管頂依次遞減，待分離溶液加于最上層。經(jīng)離心后，不同質(zhì)量的粒子（或分子）會(huì)分布于不同的密度層中。也有將待分離溶液溶于另一溶液(密度液)中 (如6MCsCl)，在離心時(shí)隨著密度液的沉降而分層者。這樣均可達(dá)到較好的分離效果。

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