Coombs試驗(yàn)
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Coombs試驗(yàn)即抗人球蛋白試驗(yàn),是檢測血液中溫反應(yīng)性抗體的一種方法,也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標(biāo)。溫抗體中50%以上由IgG介導(dǎo),其次為IgM,IgA和C3d等,因此本試驗(yàn)應(yīng)分選各種單克隆抗體同時(shí)測定。Coombs試驗(yàn)分為直接試驗(yàn)(直接反應(yīng))和間接試驗(yàn)(間接反應(yīng)):直接試驗(yàn)的目的是檢查紅細(xì)胞表面的不完全抗體;間接試驗(yàn)的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。
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原理
不完全抗體(IgG)無法架接2個(gè)鄰近的紅細(xì)胞而只能和一個(gè)紅細(xì)胞抗原相結(jié)合。抗人球蛋白抗體是完全抗體,可與多個(gè)不完全抗體的Fc段相結(jié)合,導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,稱為抗人球蛋白試驗(yàn)陽性。直接Coombs試驗(yàn)陽性說明病人紅細(xì)胞表面上包被有不完全抗體(比如IgG)。而間接Coombs試驗(yàn)陽性則說明病人血清中存在不完全抗體。
方法
(1)直接coombs試驗(yàn) :是測定吸附在紅細(xì)胞膜上的不完全抗體和補(bǔ)體較敏感的方法,是診斷AIHA的重要依據(jù)。在生理鹽水內(nèi),吸附不完全抗體或補(bǔ)體的致敏紅細(xì)胞并無凝集,因?yàn)椴煌耆贵w是單價(jià)的。加入完全、多價(jià)的抗人球蛋白抗體后,后者與不完全抗體Fc段相結(jié)合,起搭橋作用,可導(dǎo)致致敏紅細(xì)胞相互凝集,即直接Coombs試驗(yàn)陽性。根據(jù)加入的抗人球蛋白不同,可鑒別使紅細(xì)胞致敏的是IgG抗體還是C3。
(2)間接coombs試驗(yàn):用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標(biāo)本加入具有特異抗原的紅細(xì)胞懸液中,如果抗原抗體相應(yīng)則發(fā)生結(jié)合,再加入抗球蛋白抗體,則出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集。本法多用于檢測母體Rh(D)抗體以及因紅細(xì)胞不相容的輸血而產(chǎn)生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清,如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補(bǔ)體血清等,分析與紅細(xì)胞表面結(jié)合的不完全抗體的Ig亞類。
參考值
直接和間接Coombs’試驗(yàn)均為陰性,也就是說正常人這兩個(gè)試驗(yàn)都應(yīng)該是陰性。
臨床意義
1.陽性:見于新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血(AIHA)、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、惡性淋巴瘤、甲基多巴及青霉素型等藥物性溶血反應(yīng)。
2.AIHI大多屬于溫抗體型(即于37°C條件下作用最強(qiáng),主要為IgG),但也有小部分屬于冷抗體型(主要為IgM),故必要時(shí)于4°C條件下進(jìn)行試驗(yàn),排除假陰性反應(yīng)。
3.AIHA大多為IgG型抗體,還有IgG+C3型等,故應(yīng)使用廣譜的抗人球蛋白血清進(jìn)行試驗(yàn)
參考文獻(xiàn)
- 《診斷學(xué)》人民衛(wèi)生出版社第七版醫(yī)學(xué)教材.陳文彬、潘祥林主編
- 《內(nèi)科學(xué)》人民衛(wèi)生出版社第七版醫(yī)學(xué)教材.陸再英、鐘南山主編
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